四川羊肚菌菌(jun1)种(zhǒng)生产基地浅谈羊肚菌菌种的培育方法
发(fā)布(bù)日期:2019-05-06
本(běn)技术公开了(le)一种中药材的优质高产(chǎn)种植方法(fǎ)。该方法包括以下(xià)步骤:(1)母种的制作及培养(yǎng),包括(kuò)①制作母种培(péi)养基(jī):将250g土豆、30g琼(qióng)脂(zhī)、25g葡萄糖和3g维生素B放入2000ml的水中加热,直至琼脂完全煮化即得母种(zhǒng)培养基,②培育母种:将试管放入密封的无菌接(jiē)种箱中,每个试管中接入1cm×1cm的(de)菌丝(sī)后,置于20℃培(péi)养箱(xiāng)中,直至生长成母种;(2)原种的制作(zuò)及(jí)培(péi)养,包括(kuò)①制作原种培养基:取小麦80%、木销10%和麦麸10%,将所述小(xiǎo)麦(mài)煮熟后捞(lāo)出,与所述木销和麦麸(fū)搅拌(bàn)均匀,水分控制在(zài)60-80%,100℃下保温6小时,②培育原种;(3)栽(zāi)培中的制(zhì)作及培养,包括(kuò)①制(zhì)作栽培种培养基和②培育栽培种(zhǒng)。本技术中,培育出优良的(de)羊肚菌菌(jun1)种(zhǒng),提(tí)高了种(zhǒng)植的存(cún)活率。
具体(tǐ)实(shí)施方式(shì)
一种羊肚菌菌种的培育方法(fǎ),该(gāi)方法(fǎ)包括以下步骤:
(1)母种的制作及培养
①制(zhì)作母种培养基:将(jiāng)250g土豆,30g琼脂,25g葡萄糖和3g维生素B放入(rù)2000m1
的水中(zhōng)加(jiā)热(rè),直至琼脂完全煮化即得母种培养基;
②培育母种:取(qǔ)所述母种培(péi)养基 200ml装入300ml的试管(guǎn)中,用棉花塞住(zhù)管口,将(jiāng)所述试管放在125℃的高压灭菌(jun1)锅内灭菌1. 5h冷却(què)至室(shì)温后(hòu),将所述试(shì)管放(fàng)入密封的无菌接种(zhǒng)箱中,每个试(shì)管中接入1cmX 1cm的菌(jun1)丝后,置于20℃培养箱中,直(zhí)至生长成(chéng)母种。
在步骤(1)中,土豆需(xū)要预先放入水(shuǐ)中煮半小时,之(zhī)后将其捞山,再与琼脂、葡萄糖、维生素B一起放(fàng)入水中煮,直(zhí)至琼脂煮化,将煮好(hǎo)的培养基放在试管里,等凝固之后,再(zài)用棉花寒住试管的管口。进(jìn)行母(mǔ)种的(de)培育时,在将试管放(fàng)入接种箱之前,还需要用(yòng)75%的酒(jiǔ)精(jīng)擦拭(shì)试(shì)管,对试管的(de)外(wài)壁进行洒精消(xiāo)毒。
在将试管放进无菌(jun1)接(jiē)种(zhǒng)箱(xiāng)内(nèi)时,还需要将用(yòng)于接种(zhǒng)的下其一同放(fàng)进接种(zhǒng)箱的(de),如:托盘、酒(jiǔ)精灯、打(dǎ)火(huǒ)机、器皿、接(jiē)种(zhǒng)钩、镊子等一起放入(rù)接种(zhǒng)箱内进行消毒处理.对于接种箱内的消毒处理(lǐ),可以(yǐ)将(jiāng)装有高锰(měng)酸钾和甲醛混合物的被子放(fàng)入接种箱(xiāng)内,消(xiāo)毒时(shí)保证接种箱的密封。
(2)原种的制作(zuò)及培养
①制作原(yuán)种培养(yǎng)基:以(yǐ)质量分数计,取小麦80
%、木销10%和麦麸10%,将所述(shù)小麦煮熟后捞出,与所述木(mù)销和麦数搅拌均匀(yún),水分(fèn)控制在60-80 %
,装入培养瓶中,瓶口用棉花(huā)塞住,将所述(shù)培养(yǎng)瓶(píng)放(fàng)在火菌锅里火菌后,100℃下(xià)保温6小时,取出冷(lěng)却后即得原(yuán)种培养基;
②培育原种:将所述培养瓶和装(zhuāng)有(yǒu)母种的试管放入接种箱(xiāng)中密封半小时后(hòu),再将试管中的毋(wú)种接入到所述原种培养基的培(péi)养瓶中,保(bǎo)持温度20℃即可(kě)。
(3)较培中的(de)制作及培养
①制作栽培(péi)种培(péi)养基:以质量(liàng)分(fèn)数计,取小麦75%煮熟(shú)后捞出,放入(rù)15%木销(xiāo)、
5%麦麸和5%泥上(shàng)搅拌均匀,含水量(liàng)60% -80%.装入聚丙烯袋中封(fēng)口,将所述聚丙烯袋(dài)放(fàng)在灭(miè)菌锅里灭菌(jun1).常压100℃下保存4小时,取出冷却至室温:
②培育(yù)栽(zāi)培种(zhǒng):将(jiāng)所述聚丙烯袋和原种培(péi)养基的培(péi)养(yǎng)瓶置于接(jiē)种箱中密(mì)封半小时后,再(zài)将(jiāng)步骤(zhòu)(2)培(péi)养的(de)原(yuán)种接入到所(suǒ)述聚丙烯袋(dài)巾,在20℃环境下培养(yǎng)15-20天可获得栽培(péi)种。
在上述的步骤(1)之前,还需(xū)要采集新鲜的羊肚菌子实体(tǐ),将(jiāng)子实体切成(chéng)直径
2-3mm的菌块,取(qǔ)经(jīng)过高压灭菌的PDA培养纂,将所述菌块放在PDA培养基上,将所(suǒ)述PDA培(péi)养基置(zhì)于20℃的培(péi)养箱中,,周后(hòu)可(kě)获得菌丝。
在(zài)本方案中,接种箱始(shǐ)终处于无菌状态,在进(jìn)行培养基的接种处理(lǐ)时(shí),在(zài)接种箱内放入一杯装有(yǒu)高锰酸(suān)钾和甲醉的混合液体,用于对接种箱内的空气进行杀菌消(xiāo)毒处理(lǐ)。
与现(xiàn)有(yǒu)技术相比.本(běn)技术实(shí)施(shī)例具有以下优点:
通过应用本技(jì)术实施例的技术方案,在羊肚(dù)菌菌种的培育过程中(zhōng),通过(guò)对现有技术中(zhōng)的培养基配方进行改进,在(zài)菌种培(péi)育的各阶段采用不同的培养(yǎng)基达到最好的培育效果,木方(fāng)案提供的(de)菌(jun1)种(zhǒng)培育方法(fǎ),培育出(chū)的羊肚菌菌种品质优良,同(tóng)时,大大提高了羊肚菌种(zhǒng)植的存活率。